レドックスアッセイ チオール定量キット
- レドックスアッセイチオール定量キットは、血清・血漿の酸化ストレスマーカーであるチオールを、マイクロプレートリーダー(96ウェル)で迅速に定量することができます。
- 本製品は免疫抗体法ではなくチオール選択的酸化剤であるDTNBを用いるため、試料の生物種に依存しません。
- 前処理不要です。
- キット同梱の標準試料とブランク試料の2点により校正するため、多点校正は不要です。
- 毒劇物を含んでいないため、取扱、廃棄時の安全性に優れています。
- ※ 本製品は研究用キットです。診断目的には使用しないでください。
- 名称
- チオール定量
- 製品コード
- TH01D
- 測定対象
- チオール(SH)基
- 対象サンプル
- 血清・血漿
- 測定波長
(極大波長) - 380 ~ 440 nm (412 nm)
- 測定範囲
- 0.05 ~ 2.0 mM
- 測定回数
(1キット) - 100回
- 価格/円(税別)
- 59,000
測定意義
チオール基は生体内においてアルブミン等のタンパク質、グルタチオン、遊離チオール基等として存在します。チオールは強い還元能を持ち、活性酸素種と速やかに応答し、活性酸素を消去し、ジスルフィドとなります。タンパク質チオール基は他のアミノ酸側鎖と比較して酸化修飾を受けやすく、いくつかのタンパク質や酵素がチオール基の酸化還元状態により、機能を制御されています。
血清中のチオール濃度は生体内のレドックス環境の指標の1つであり、酸化ストレスマーカーとしても着目されています。がんや肝疾患など、様々な疾患において血清チオール濃度が低下していることが報告されており、血清チオール濃度が疾病・老化などに係る指標となる可能性が示唆されています。
測定原理
本法はEllman試薬(DTNB:5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid))とチオール(SH)基との反応による可視部の発色を観測し、SH基の総量を求めるものです。DTNBはSH基と反応し、TNB(5-Mercapto- 2-nitrobenzoic acid)を生成します。この生成物の波長412nmにおける吸光度を測定することにより、試料中のチオール基の濃度を求めます。
測定方法
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◯本キットでダイレクトに定量可能な試料
e.g.)血清、血漿
キット操作方法
※使用する直前に標準試料(アセチルシステイン粉末)をラベル記載の水量にて溶解さてください。
※溶解させた標準液は冷凍で保管してください。
- (1) DIW、標準液、アッセイ検体 20 μlを96 well plateにアプライ
- (2) RA 200 μlをwellへ添加
- (3) 室温で5分間インキュベート
- (4) 主波長412 nmの吸光度を測定(OD1)
- (5) RB 30 μlをwellへ添加
- (6) 室温で5分間インキュベート
- (7) 主波長412 nmの吸光度を測定(OD2)
- (8) 以下の計算式よりチオール濃度を求める
製品仕様
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- 使用目的 :
- チオール(SH)基の定量
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- 測定試料 :
- 血清,血漿
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- 測定波長(極大波長) :
- 380 ~ 440 nm (412 nm)
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- サンプル量 :
- 20 μL
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- 測定範囲 :
- 0.05 〜 2.0 mM
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- 感度 :
- チオール 1.0 mMの標準試料を測定したとき、ΔOD = 0.5 〜 1.0
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- 同時再現性 :
- C.V. < 5 %
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- 特異性 :
- 生物種を問いません。
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- 反応条件 :
- 室温 (25 〜 37 ℃) 10分間
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- 保存温度 :
- 2 〜 8 ℃
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- 有効期限 :
- 製造後12ヶ月
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- 法規制 (毒物及び劇物取締法) :
- 該当なし