メタロアッセイ 鉄 測定 LS（ニトロソPSAP法）

• メタロアッセイ鉄測定LS(ニトロソPSAP法)は、生物試料(血清・血漿・尿など)中の鉄(Fe²⁺,Fe³⁺)をマイクロプレートリーダー(96ウェル)で迅速に定量することができます。
• 本アッセイ原理は免疫抗体法ではなく、キレート定量法であるため、検体の生物種に依存しません。
• 血清、血漿、尿を検体とする場合は前処理不要です。
• キット同梱の標準試料とブランク試料の２点により校正するため、多点校正は不要です。
• 毒劇物を含んでいないため、取扱、廃棄時の安全性に優れています。
• ※ 弊社製品マイクロアッセイ UIBC(不飽和鉄結合能)キットとの併用で、TIBC(総鉄結合能)の測定に応用可能です。
• ※ 本製品は研究用キットです。診断目的には使用しないでください。

製品仕様

測定意義

鉄は重要な構成元素として多くの酵素中に含まれています。血中の鉄はすべてトランスフェリンと結合しており、ミオグロビン、ヘモグロビンなど、鉄を必要としているグロビンタンパク質の合成のため、赤芽球や各組織へ輸送されます。酸素を輸送するタンパク質の生成には鉄は不可欠であり、その欠乏は鉄分欠乏性貧血、慢性出血性貧血、感染性の貧血を引き起こします。また、肝炎、肝硬変などでトランスフェリンの増加、高濃度の鉄が観測されます。再生不良性貧血、悪性貧血なども鉄の増加を示します。

測定原理

本法はNitroso-PSAPと鉄とのキレート錯体形成による可視部の呈色を観測し鉄濃度を求めます。

トランスフェリン等の輸送タンパク質に結合している鉄を、試薬中の弱酸、変性剤により解離させ、 鉄-Nitroso-PSAP錯体を形成させます。この錯体を波長 750nm で測定することにより鉄濃度を求めることができます。

測定方法（サンプル前処理）

本キットでダイレクトに定量可能な試料

例：血清、血漿、尿

キット中の変性剤が鉄をタンパクから解離させ、還元剤によって還元したのち発色させます。特に前処理は必要ありません。

※EDTAを含む採血管は測定値に影響を与えるので使用しないでください

※蓄尿をサンプルとする場合は、塩酸添加による保存法を行って下さい。測定の際はpHを2~3になるよう調整してください。

酸抽出の必要な試料

例：細胞ライセートや組織ホモジネート、その他液状試料

サンプルを低pHにすることでタンパクから鉄を解離させ、上清として回収し、アッセイ検体とします。ただし、測定できるのは以下の化学種に限ります。

• 遊離鉄
• タンパク結合（配位）鉄（ Protein-Fe²⁺、e.g.トランスフェエリン、フェリチン、メタロチオネイン）
• その他、配位結合性鉄

※EDTAを含むLysis bufferは測定値に影響を与えるので使用しないでください。

※有機鉄やヘム鉄などは酸分解を行って下さい。

マイクロウエーブ法及び有機物混酸分解が必要な試料

例：EDTAなどの強固なキレート剤を含む試料、有機鉄（ -C-Fe-C- 単結合している場合）、環状配位子内包鉄 （Fe-ポルフィリン等）を測定したい試料

酸抽出では解離してこない化学種を測定する場合や、強力な鉄キレート剤などの妨害物質を含むサンプルの測定に必要です。

（各分解法に基づいて有機物を分解した後、pH2~3に調整し、定容したのちにアッセイ検体としてください。）

キット操作方法

製品仕様

• • 使用目的 :
  • 鉄(Fe²⁺,Fe³⁺)の測定
  • → 弊社製品マイクロアッセイ UIBC(不飽和鉄結合能)キットとの併用で、TIBC(総鉄結合能)の測定に応用可能です。
• • 測定試料 :
  • 血清，血漿，尿，唾液，細胞ライセート，組織抽出液，植物抽出液，毛髪試料抽出液，食品抽出液，飲料水，環境水，鉱水など
• • 測定波長(主波長) :
  • 750 nm
• • 感度のある波長域 :
  • 740 ～ 760 nm
  • 他の波長域をご希望の場合 → メタロアッセイ 鉄 測定 LS（フェロジン法）
• • 測定範囲 :
  • 10 ～1,000 µg/dL
• • アッセイ法 :
  • N-PSAP法
• • 特異性 :
  • 生物種を問いません
• • 反応条件 :
  • 室温（25°C〜37°C）10分間
• • 保存温度 :
  • 2-8°C
• • 有効期限 :
  • 製造後12ヶ月
• • 共存物質の影響 :
  • 抱合型ビリルビン･非抱合型ビリルビン30 mg/dL
    乳び500FTU
    ヘモグロビン 0.1 g/dL
    ただし、EDTAは影響を与えますので使用しないでください。
• • 対応している検出機器:
  • マイクロプレートリーダー、紫外可視分光光度計、比色計
    ※キットに96ウェルプレートやキュベットなどは含まれておりません
  • 生化学自動分析装置をご使用の場合 → メタロアッセイオート 鉄 N

実施例

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学術情報